伊布替尼可能会改善慢性淋巴细胞白血病患者的CAR T细胞产生

在国际癌症杂志上发表的一项研究中，依鲁替尼(Imbruvica)在嵌合抗原受体(CAR)T细胞培养过程中提高了CAR T细胞产品的产量和功能，可用于治疗慢性淋巴细胞性白血病(CLL)患者。 Sellner等人通过台盼蓝染色评估了CAR T细胞生成过程中的绝对细胞数。在细胞生成过程中，与HD衍生细胞相比，CLL衍生细胞的细胞增殖明显降低。BTK抑制剂可在CAR T细胞生成的第10天显着增加HD衍生细胞的细胞扩增(不使用依鲁替尼的患者为20.67±8.82×106，而使用依鲁替尼的患者为25.28±10.29×106;P = .0248)，在第10天(3%±8%对87%±7%; P = .0183)和第14天(依法鲁替尼似乎显着增加了HD的CD3阳性T细胞的生存能力)(84%±8%对91%±分别为6%;P = .0202)。

在第10天(不使用依鲁替尼的患者为60%±15%，使用依鲁替尼的患者为69%±12%; P = .0086)和第14天(分别为47%±14%和59%±14%; P = .0142)，CLL-衍生细胞具有更高的转导效率。依鲁替尼在细胞生成的第10天和第14天时，源自CLL患者的CAR T细胞的绝对数量显着更高(无依鲁替尼时为1.52±1.74×106，而有依鲁替尼时为2.61±4.57×106; P = .0138和4.05± 4.37×106与7.20±6.58×106;分别为P = .003)。在第10天和第14天，只有有限数量的CD20阳性B细胞可能恶变。 与源自HD的患者相比，来自CLL患者的CAR T细胞中的CD4阳性T细胞量较高，而CD8阳性T细胞量较低。在培养CLL和HD衍生的CAR T细胞的过程中，依鲁替尼似乎对CD4阳性和CD8阳性T细胞的分布没有任何影响。 在先前的研究中，几乎所有CAR T细胞在生产过程中都是CD95阳性的，而在HD衍生的CAR T细胞中，依鲁替尼补充的生产能够在第10天使所有CD3阳性T细胞中的Tn细胞富集(25无依鲁替尼的情况下为%±11%，有依鲁替尼的情况下为40%±11%; P = .0009)，CD3 / CD4阳性细胞(17%±9%对32%±13%; P = .0016)和CD8阳性细胞(与依鲁替尼组相比：34%±13%对53%±9%;P = .0007);在第14天，所有CD3阳性细胞中的这种含量进一步增加，分别与不使用依鲁替尼的情况相比(分别为28%±12%和45%±13%，P = .0162)，CD3 / CD4阳性细胞(20%± 7%和33%±13%; P = .0139)和CD3 / CD8阳性细胞(35%±15%vs55%±8%; P = .0038)。 与HD衍生的PBMC相比，CLL衍生的PBMC具有显着较低的Tn细胞比例(20%±16%vs 5%±3%;P = .0216)和显着较高的TEM细胞比例(%±12%vs 49) %±12%;P = .0142)。 补充依鲁替尼的CAR T细胞产量可在第10天显着富集与不与依鲁替尼相比的TN细胞(CD3阳性：2%±2%vs 5%±3%，P = .0213; CD3 / CD4阳性：1分别为%±1%和4%±3%; P = .0122)和14(CD3 / CD4阳性：2%±2%vs 6%±6%; P = .0449)。 Tn CAR T细胞的绝对产量非常重要，除了在不同T细胞亚群的分布过程中。在不使用依鲁替尼的情况下，BTK抑制剂能够在第10天显着增加CD3阳性Tn CAR T细胞的绝对数量(1.69±1.16×106 vs 4.39±2.23×106;P = .0478)和14(4.55±1.2) ×106 vs 22.45±10.34×106; P = .0488)。在不使用依鲁替尼的情况下，在第4天CD4阳性Th细胞中观察到这种显着增加(0.64±0.25×106对2.2±1.02×106;P = .0447)和14(1.72±0.59×106对3.98±1.71× 106; P = .0412)，以及第10天的CD8阳性T细胞(0.99±0.94×106 vs 2.22±1.51×106; P= .0393)和14(2.83±1.49×106与14.61±7.95×106; P = .0357)。 研究人员在论文中指出，在不使用依鲁替尼的情况下，使用CLL衍生的PBMC在第10天的生产中也观察到CD3阳性Tn CAR T细胞的产量增加((2.32±1.87×104vs 9.76±0.06×104; P = 0.0017)和14(6.81±9.18×104对25.21±30.32×104; P = .0439)，并且在CD4阳性的第10天和第14天观察到TN CAR T细胞的产量增加(0.70± 0.60×104vs 5.76±0.03×104; P = .0049; 2.52±2.58×104vs 16.21±18.90×104; P = .0500)和CD8阳性(0.99±1.03×104vs 2.39±0.05×104; P = .0102和3.14±5.87×104vs 6.66±9.37×10; P = .0403)T细胞分数。 在HD和CLL衍生的CAR T细胞中，两种生产策略之间的CXCR3表达均未观察到差异，但是在第14天用依鲁替尼在CLL衍生的CAR T细胞中培养后，发现CD62L的表达明显更高(P = 0455)。 在第10天(59%±24%vs 52%±20%; P = .0063)和14天(44%±22%vs 32%±16%)，CLL衍生的CAR T细胞中PD-1表达也降低。P = .0149)分别与不使用依鲁替尼相比，而在第10天，HD衍生的CAR T细胞中基于依鲁替尼的生产，TIM-3表达显着降低(90%±10%对74%±20%;P = .0224)和14(73%±20%vs 56%±28%; P = .0425)，以及CLL衍生的CAR T细胞(96%±3%vs 82%±17%; P = .0305和86%±11%与72%±20%;P = .0066)。第10天，依鲁替尼在HD衍生和CLL衍生的CAR T细胞中LAG-3表达也降低(37%±16%vs 18%±10%;P = .0178和69%±21%vs49%±19 %;P = .0002)和14(分别为34%±17%和22%±14%; P = .0242)。 在CLL患者的CAR T细胞中存在依鲁替尼，可显着提高细胞内TNF-α的产生(无依鲁替尼：47%±11%对60%±18%;P = .0392)，尤其是CD8 -阳性CAR T细胞亚群(35%±12%vs 51%±18%; P = .0322)。依鲁替尼产生的CD8阳性CART细胞的IFN-γ也更高(与依鲁替尼相比：52%±12%对63%±8%;P = .0428)。然而，在两种生产策略之间未观察到产生TNF-α和产生IFN-γ的多功能CAR T细胞的显着差异。 在CAR T细胞介导的细胞毒性功能分析中，依鲁替尼似乎对HD和CLL衍生的CAR T细胞对CD19阳性Daudi细胞的体外细胞毒性能力没有显着影响。对CD19阴性K-562细胞也没有相关的非特异性细胞毒性。 对于患有CD19阳性B细胞恶性肿瘤的患者，CD19-CAR T细胞疗法是一种有前途的治疗方法。但是，与急性淋巴细胞白血病和弥漫性大B细胞淋巴瘤相比，CLL患者的疗效明显较低。因此，需要新的策略来改善CLL患者使用CAR T细胞的临床获益。总之，研究人员指出，需要进一步的分析，包括对本研究结果的体内验证，以证明这一概念可用于CLL患者的CAR T细胞治疗。 相关阅读推荐：《Obinutuzumab可在慢性淋巴细胞白血病中实现深度缓解》